Клеточные культуры

Мы остановимся лишь на основных понятиях и терминах, касающихся размножения вирусов в клеточных культурах; более подробную информацию можно найти в специальных руководствах. С середины XX в. широкое распространение получил метод культивирования вирусов в культурах клеток, выделенных из разных органов животных, и была заложена основа коллекций клеточных культур, ныне всемирно известных и активно пополняемых. Использование метода клеточных культур произвело настоящую революцию в вирусологии, поскольку с ними намного проще работать, чем с лабораторными животными. На клеточных культурах были впервые выделены многие ранее неизвестные вирусы, в том числе герпесвирусы 6- и 8-го типов, вирус ВИЧ и ряд других. Клеточные культуры очень широко применяются в вирусологии для выделения вирусов от больных, для накопления вирусного материала с целью производства вакцин, для изучения онтогенеза вирусов, для тестирования противовирусных препаратов и т. д. Однако следует иметь в виду, что условия размножения вируса in vitro иные, чем в организме животного. Главное различие, как уже отмечалось, состоит в том, что в клеточной культуре вирус не подвержен воздействию со стороны иммунной системы хозяина и поэтому часто теряет гены, отвечающие за подавление иммунного ответа. Клеточные культуры классифицируют по происхождению (вид животного, орган, ткань), по методу получения, по способности клеток прикрепляться к субстрату, по приемам культивирования, по биологическим и биохимическим свойствам и т. д. В общем случае различают первичные и перевиваемые клеточные культуры. Эти культуры получают непосредственно из эмбриональных органов, а также из органов новорожденных или молодых животных путем мацерации тканей и высева клеток в сосуды с питательной средой (см. рис. 4). Вирусологи особенно часто используют первичные культуры почки эмбрионов, поскольку они наиболее чувствительны ко многим вирусам. Одним из примеров успешного применения первичных культур служит выделение группой тайваньских ученых в 2003 г. коронавируса SARS, этиологического агента атипичной пневмонии. В данном случае использовалась первичная культура почки эмбриона макаки-резуса (Масаса mulatto). Будучи высокочувствительными к вирусному заражению, первичные клеточные культуры имеют ряд недостатков. Во-первых, клетки в них совершают лишь ограниченное число последовательных делений (в среднем 50), после чего культура стареет и погибает. Во-вторых, каждый раз берутся клетки нового животного, поэтому такие культуры невозможно стандартизировать. В-третьих, они могут контаминироваться латентными вирусами.