Куриные эмбрионы
Куриные эмбрионы используются для размножения разных вирусов, конечная концентрация, или титр, которых может достигать 109 частиц-мл’1. Однако подлинный расцвет медицинской вирусологии наступил после внедрения метода культивирования вирусов на клеточных культурах in vitro, разработанного в 1948-1955 гг. американскими вирусологами Джоном Эндерсом (J. Enders), Фредериком Роббинсом (F. Robbins) и Томасом Уэллером (Т. Weller). Схема приготовления клеточной культуры путем трипсинизации ткани приведена на рис. 4. Подготовка питательной среды и посуды, выращивание клеточной культуры и ее инокуляция вирусом, а также культивирование зараженного хозяина в аксеничных условиях осуществляются с помощью классических приемов, используемых при культивировании бактерий. Дальнейшее совершенствование этого метода привело к появлению клональных клеточных культур, впервые полученных в 1948 г. американскими цитологами Кэтрин Стэнфорд Методический прорыв — возможность размножения вирусов на клеточных культурах — избавил вирусологов от необходимости пассировать их на животных. В свою очередь, возможность получать вирусные препараты с высоким «выходом» способствовала быстрому развитию биохимической вирусологии, которая в дальнейшем переросла в молекулярную вирусологию. Вирусное заражение клеточной культуры приводит к разнообразным последствиям: лизису клеток; слиянию клеток в симпласт; образованию специфических включений и т. д. Использование клеточных культур позволило не только изучать патогенные последствия вирусной инфекции, но и открыть новых представителей вирусов, а также исследовать молекулярные механизмы их репродукции. Имея в распоряжении достаточное количество материала, вирусологи выяснили структурные особенности и генетическую стратегию вирусов. Они расшифровали механизмы репликации, транскрипции и трансляции, используемые при размножении вирусов, а также изучили способность некоторых вирусов переходить в латентное состояние вследствие встраивания их генома в геном клетки-хозяина. Было показано, что такой переход не только обеспечивает персистенцию вирусов, но и может приводить к трансформации зараженной клетки, в том числе к ее малигнизации.