Детали строения оболочных вирусов

Детали строения несимметричных, в частности оболочных, вирусов можно изучать с помощью метода Криоэпектронной томографии (англ, cryo-electron tomography), разработанного в начале 2000-х годов. Он позволяет получить ЗЭ-изображение произвольно выбранной вирусной частицы, отражающее структуру ее поверхности и ее внутреннее устройство. В данном случае объемное изображение генерируется компьютером путем суммирования серии изображений, получаемых под разными углами наклона образца. Этот метод был впервые применен в 2003 г. для получения ЗЭ-изображения вирионов вируса простого герпеса. В настоящее время с его помощью достигнуто разрешение —1,5 нм, что позволяет идентифицировать структурные белки. Основное достоинство криоэлектронных томограмм несимметричных вирусов по сравнению с ЗБ-реконструкцией симметричных вирусов заключается в том, что в первом случае можно увидеть отдельные детали строения вирионов. В частности, установлено, что одна из вершин капсида вируса герпеса имеет особое строение и соответствует порталу для упаковки ДНК. Ценную информацию о морфогенезе вирионов можно получить при помощи Сканирующей электронной микроскопии (англ, scanning electron microscopy, SEM). В данном случае электронный луч «прочесывает» образец, формируя изображение рельефа поверхности. При подготовке препарата его обезвоживают, и на его поверхность напыляют металл, что приводит к деформации и сглаживанию деталей. Разрешение SEM лимитируется диаметром луча, а также методикой напыления и обычно составляет 2-3 нм, что на порядок ниже разрешения при ТЕМ. Поэтому SEM применяется в вирусологии только для решения ограниченного круга задач. Таким путем можно, например, изучать отпочкование оболочных вирусов. Достоинства и недостатки SEM хорошо иллюстрируются примером вируса гриппа: благодаря большой глубине резкости на поверхности клетки видны отпочковывающиеся вирионы, однако не заметна «щетка» молекул гемагглютинина на вирионах, легко выявляемая методом негативного контрастирования.