Размножение вируса в культуре

Размножение вируса в культуре не всегда сопровождается выраженным ЦПД, например, вирус краснухи (Rubella virus, сем. Togaviridae) обычно размножается довольно вяло. При электронно-микроскопическом исследовании в клетках помимо вирусных фабрик выявляется гипертрофированный аппарат Гольджи, хотя на светооптическом уровне наблюдаются лишь незначительные морфологические изменения, не препятствующие образованию полноценных вирионов. Для размножения вируса краснухи, природным хозяином которого является только человек, используют культуру клеток человеческого эмбриона или культуру RK13 (перевиваемые клетки эпителия почки кролика). Клеточные культуры являются общепринятой моделью для количественной оценки инфекционной активности препаратов вирусных частиц. Чтобы определить титр, приготавливают серию десятикратных или двукратных разведений в пробирках объемом 1 мл; оттуда материал высевают в лунки планшета с клеточной культурой и наблюдают проявление ЦПД. Там, где был внесен материал с высоким содержанием инфекционных частиц, ЦПД развивается достаточно быстро и охватывает основную часть клеток. В лунках с очень низким содержанием инфекционно активного вируса, либо с его полным отсутствием, ЦПД не наблюдается. За инфекционную дозу-50 (англ, tissue culture infectious dose-50, TCID50) принимают количество вируса, которое вызывает появление ЦПД у 50% зараженных клеток. Например, если титр равен шести lgTCID50, это значит, что в исследуемом материале содержится 106 инфекционных доз, т. е. посев из 6-го десятикратного разведения дает выраженное ЦПД; при посеве из 7-го разведения в монослое появляются только отдельные бляшки; 8-е и дальнейшие разведения оказываются инфекционно не активными. Если произвести подсчет бляшек (что не всегда возможно и зависит от характера ЦПД), можно выразить титр в бляшкообразующих единицах — БОЕ (англ, plague forming unit, PFU).

В настоящее время в связи с развитием генной инженерии методы размножения вирусов в перевиваемых клеточных культурах переживают расцвет. Многие клеточные линии, ранее считавшиеся малопригодными для культивирования, можно преобразовать в высокопродуктивные системы, оснащая их соответствующими рецепторами и прочими факторами, необходимыми для размножения вирусов.