Использование сыворотки

Использование сыворотки значительно улучшает условия роста клеток культуры, однако несет угрозу контаминации посторонними вирусами, микоплазмами и прионами. Одним из наиболее частых кон — таминантов в телячьей сыворотке служит вирус бычьей диареи/болезни слизистой (Bovine viral diarrhea virus, BVDV), персистентно инфицирующий 30-70% поголовья. В последние годы наметилась тенденция перехода на бессывороточные питательные среды, поскольку многие ростовые факторы научились получать генноинженерным способом. В зараженной культуре видоизменяется форма клеток (например, они округляются), нарушается пролиферативная активность (клетки быстро стареют, либо, наоборот, начинают активно делиться), локально или полностью распадается монослой и т. д. Перечисленные эффекты называются Цитопатическим действием, сокращенно ЦПД (англ, cytopathic effect, CPE). Для некоторых вирусов цитопатическое действие особо ярко выражено. Например, при инфекции аденовирусами (сем. Adenoviridae) клетки открепляются от внутренней поверхности сосуда, округляются, собираются в гроздья и лизируются; при обычной множественности заражения монослой за сутки практически полностью распадается. Герпесвирусная инфекция (сем. Herpesviridae) характеризуется появлением увеличенных округлившихся клеток с раздутым ядром. В свою очередь, при размножении спумавирусов (сем. Retroviridae) в клетках появляются множественные вакуоли, они как бы вспениваются (лат. spuma — пена). Наконец, размножение па — рамиксовирусов (подсем. Paramyxovirineae), сопровождается слиянием клеток с образованием многоядерных синцитиев. Во многих случаях по характеру ЦПД можно определить, какой именно вирус вызвал поражение.